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目的探讨氨
茶碱对大鼠气道平滑肌细胞(ASMCs)增殖抑制及其与基质金属蛋白酶(MMPs)的关系。方法,分离大鼠气道平滑肌,在含有10%胎牛血清的DMEM中培养,第4~6代细胞用于实验,细胞用不同浓度氨茶碱诱导培养48h;采用细胞计数法观察并比较不同浓度氨茶碱对培养细胞的增殖抑制作用;明胶酶谱和Western blot检测细胞MMP2、MMP9的活性及表达。结果氨茶碱以浓度依赖的方式降低存活的细胞数;2)Westernblot结果显示:含10%胎牛血清的细胞培养液内,有MMP2、MMP9表达,50、100、200mg/L氨茶碱作用48h后,细胞培养液内MMP2、MMP9蛋白水平较对照组显著降低(P<0.05),且呈剂量依赖效应;其中,100、200mg/L氨茶碱作用后,较对照组降低非常显著P<0.01);3)明胶酶谱结果显示:氨茶碱作用48h后明胶酶活性亦明显降低,相应氨茶碱浓度细胞培养液内MMP2、MMP9降解明胶面积(mm2)分别较对照组显著降低(P<0.05),且呈剂量依赖效应;其中,100、200mg/L氨茶碱组较对照组降低非常显著(P<0.01)。结论氨茶碱以剂量依赖效应抑制大鼠ASMC中MMP2、MMP9的活性及蛋白表达,从而抑制气道平滑肌细胞增生,参与气道重塑的治疗。
完成机构:延安大学附属医院,陕西延安716000
新昌
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