目的 探讨
茶多酚特异性诱导胰腺癌细胞死亡的线粒体机制。方法 电子显微镜下观察茶多酚处理后胰腺癌细胞的形态学变化。三磷酸腺苷生物发光法检测茶多酚作用下胰腺癌细胞ATP含量的变化,MitoCapture法检测茶多酚作用下胰腺癌细胞的线粒体膜电位的变化。探讨细胞ATP含量与胰腺癌细胞凋亡与坏死之间的关系。Western blot技术检测茶多酚作用后胰腺癌细胞胞液中细胞色素C,caspase蛋白质含量的变化。结果 随着茶多酚浓度增高和不同浓度下作用时间延长,电镜下胰腺癌细胞线粒体肿胀,部分细胞呈坏死样改变,细胞ATP含量降低,MitoCapture阳性细胞百分数增加。ATP含量与BxPC-3细胞细胞MitoCapture阳性细胞呈负相关(r=-0.808,P〈0.01)。细胞色素C和procaspase-9释放到胞液中,胞液中可检测出活化的caspase-9,和caspase-3。结论茶多酚具有特异性诱导胰腺癌细胞死亡的功能,机制与细胞ATP含量降低,线粒体膜电位破坏,通透性增高,细胞色素C和procaspase-9释放,活化caspase-3启动胰腺癌细胞细胞凋亡过程,当ATP含量极度降低时部分胰腺癌细胞细胞出现坏死。
完成机构:[1]中国人民解放军总医院肝胆外科,北京市100853 [2]浙江大学医学院第二附属医院普外科,杭州市310009
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