目的建立叙利亚地鼠胚胎细胞(Syrian hamster embryo cell,SHE细胞)混合培养模型,研究表没食子儿
茶素没食子酸酯(epigallocatechin-3-Gallate,EGCG)对SHE癌前细胞生长、增殖和凋亡的作用,探讨EGCG的抑癌机制。方法将SHE癌前细胞和正常细胞分别按1:10000、1:1000、1:100、1:10比例接种于6孔的培养皿中,培养7d,建立SHE细胞混合培养模型。以0μmol/L EGCG为对照组,分别选取浓度为0.5、1、5、10、50μmol/L的EGCG,通过SHE细胞生长实验,原位细胞凋亡实验、原位细胞增殖实验和基因芯片检测EGCG对SHE正常细胞、SHE癌前细胞和混合培养模型中SHE癌前细胞的生长、增殖、凋亡及相关调控基因表达的影响。结果SHE癌前细胞与正常细胞的比例为1:100是合适的混合培养模型。0.5、1、5、10μmol/L的EGCG促进了SHE正常细胞的生长,而浓度为50μmol/L的EGCG抑制了SHE正常细胞的生长。在1:200比例的SHE癌前细胞和正常细胞混合培养模型中,与对照组相比,浓度为5、10μmol/L的EGCG抑制了不同大小的SHE癌前细胞克隆的生长。对照组中SHE癌前细胞的DNA合成指数和凋亡指数分别是39.3%和6.5%,5、10p,mol/LEGCG作用后SHE癌前细胞的DNA合成指数分别降至25.6%和24.8%,细胞凋亡指数分别升至12.65%和14.5%。EGCG抑制了混合培养模型中SHE癌前细胞的生长和增殖,促进了其凋亡。EGCG对于细胞凋亡的调控可能通过p53、NF—KB、bcl-2通道的基因表达来实现;EGCG对于细胞增殖的调控可能通过阻滞细胞周期G1/S期实现。结论EGCG可能是通过抑制癌前细胞的增殖和促进其凋亡进而抑制癌症。
完成机构:[1]中国疾病预防控制中心营养与食品安全所,北京100050 [2]中国疾病预防控制中心传染病预防控制所,北京100050 [3]美国印第安纳大学药理和毒理系
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