日本蟳酚氧化酶的分离纯化及其部分生物化学性质研究

2021-02-23 21:14:37热度:163°C

利用离子交换层析和凝胶过滤层析等方法,从日本好(Charybdis japonica)血淋巴中分离纯化出了酚氧化酶,并以L-二羟苯丙氨酸(L—DOPA)作为特异性底物对其生化性质和酶性质进行了研究。结果表明,酚氧化酶和酚氧化酶原的分子质量分别为64.5ku和69.5ku。以L—DOPA为底物对酚氧化酶纯品进行研究发现,其最适pH值为6.0、最适温度为40℃。对底物L—DOPA和儿酚的米氏常数Km值分别为3.41和7.97mmol/L。该酶对亚硫酸钠、苯硫脲极为敏感,对硫脲、苯甲酸非常敏感,表明该酶很可能是一种儿茶酚酶型的酶。此外,EDTA,DETC,Zn^2+,Mg^2+和Cu^2+均能显著抑制该酶活性,且10mmol/L Cu^2+能有效地回复该酶被DETC所抑制的酶活性,表明该酶确为一种Cu-金属酶。

完成机构:中国海洋大学生命科学与技术学部海洋生物系,山东青岛266003

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