油茶种子cDNA文库的构建

2021-02-23 21:00:53热度:158°C

以湘林1号和湘林4号油优良无性系近成熟种子为材料。采用裂解法和改良的CTAB法提取总RAN;用磁珠法分离得到纯化的mRNA;在反转录酶和其他酶的作用下合成一链cDNA和二链cDNA;经与质料载体重组和转化大肠杆菌。成功地构建了世界上第一个油茶种子cDNA文库.经检测,文库存容量达10^6组率为88.21%.测序结果表明:克隆片段长度一般都大于600bp。说明构建的文库质量较高,能够满足ESTs文库构建及从文库中分离筛选重要基因等研究工作的需要.为进一步研究奠定了.很好的物质和技术基础.

完成机构:[1]中南林学院经济林育种与栽培国家林业局重点实验室,湖南株洲412006 [2]河南职业技术师范学院。河南新乡453003

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