小剂量茶碱对大鼠气道上皮细胞NF—kB活性的影响

2021-02-23 12:04:38热度:170°C

目的:观察小剂量碱是否对体外培养的哮喘模型大鼠气道上皮细胞中NF-kB的活性存在影响。以进一步阐明茶碱类药物抗炎作用和免疫调节作用的机制。方法:雄性Wistar大鼠随机分为2组,对照组(5只),哮喘模型组(15只);模型组以卵清蛋白致敏和激发,建立哮喘模型。体外培养哮喘模型组和对照组大鼠的气道上皮细胞。分别观察加入脂多糖(LPS)刺激前后NF-kB活性的变化;在哮喘模型组大鼠的气道上皮细胞中加入不同浓度的氨茶碱与LPS(1μg.ml^-1)共同培养4h后,以及加入同一浓度氨茶碱和LPS(1μg.ml^-1)共同培养不同时间后NF-kB活性的变化。NF-kB活性采用免疫组织化学方法检测,以细胞核染色作为阳性标准,以细胞核阳性的百分比表示NF-kB的活性。结果:经LPS刺激前,对照组和哮喘组大鼠气道上皮细胞胞浆NF-kB均有一定程度的表达。细胞核表达的细胞,哮喘组为(6.4%±1.2)%,而对照组为(4.7%±1.7)%,二者相比较,其差异具有统计学意义(P<0.05)。经1μg.ml^-1脂多糖刺激2h后,两组细胞胞核NF-kB表达均明显上升,哮喘组为(82.5±5.2)%,对照组为(79.3±3.4)%,两者相比,无统计学差异(P>0.05)。在哮喘组大鼠上皮细胞中加入lμg.ml^-1脂多糖及各种浓度氨茶碱共同培养4h后,NF-kB活性均有所下降。0μg.ml^-1(不加茶碱)组,5μg.ml^-1组,10μg.ml^-1组,15μg.ml^-1组NF-kB活性分别为(84.3±3.2)%,(82.8±2.5)%,(78.4±6.3)%,(75.6±4.1)%。除5μg.ml^-1组与0μg.ml^-1(不加茶碱处理)组之间的NF-kB活性,无统计学差异(P>0.05)外,其余各组间两两比较,差异均有显著性(P<0.05)。哮喘组上皮细胞经1μg.ml^-1脂多糖及10μg.ml^-1氨茶碱共同培养2,4,24h。2h与4h处理组NF-kB活性与不加茶碱处理组相比,差异有显著性(P<0.05)。24h组与不加茶碱处理组相比差异无显著性(P>0.05),但茶碱处理组内不同处理时间组间比较,差异无显著性(P>0.05),哮喘大鼠气道上皮细胞中的基础NF-kB活性较对照组高。结论:茶碱类药物可抑制体外培养的大鼠气道上皮细胞中的NF-kB的活性,并可能呈浓度依赖性,而与作用时间无明显关系。

完成机构:武汉大学人民医院呼吸内科,武汉430060

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