油茶随机扩增多态DNA条件的研究

2021-02-22 17:11:48热度:169°C

以改进的CTAB法提取油嫩叶总DNA,进行随机扩增多态DNA(RAPD分析,分别测试了Mg^2+浓度、引物浓度、dNTP浓度、模板DNA浓度和Taq DNA聚合酶用量对反应结果的影响,确定了油茶RAPD分析的最适反应体系:在25μIPCR反应体积中,含20ng模板DNA,2.5mmol.L^-1 MgCl2,0.2mmol.L^-1dNTP,0.3μmol.L^-1引物,lU Taq DNA聚合酶。扩增程序为:94℃预变性180s;94℃变性60s,37℃退火90s,72℃延伸120s,反应40个循环;最后在72℃延伸5min。

完成机构:[1]福建师范大学生物工程学院,福建福州350007 [2]福建省林业厅,福建福州350003 [3]福建闽侯桐口国有林场,福建闽侯350100

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